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      熒光顯微鏡使用方法及注意事項。

      時間:2022-06-09 17:30:51 來源: 點擊:

        使用方法:

        (1)將物料板放在舞臺上。

        (2)打開調節器熒光顯微鏡。然后按下啟動一套UV燈不能在15分鐘內點燃,然后收盤不能重新啟動3分鐘。

        (3)將激勵濾波器轉換為V,將分色器調整為V,選擇495或475nm阻塞濾波器。

        (4)uvfl40.uvfl100熒光鏡檢查。

        (5)在載玻片上加入非熒光油,先用40X,再用100X聚焦顯微鏡檢測熒光。

        (7)視野檢查應不斷變化,因為隨著時間的推移,照射熒光物質逐漸減弱。

        (8)紫外FL10或紫外FL20也可用作低倍顯微鏡材料(使用低倍顯微鏡時不加熒光油)。

        記錄熒光圖像的方法:

        熒光顯微鏡觀察到的熒光圖像具有形態特征、熒光顏色和亮度。在判斷結果時,必須將判斷結合起來。結果是基于主觀指標,即工人的眼睛。作為一般的定性觀察,它基本上是。隨著科學技術的發展,使用細胞分光光度計、圖像分析儀等儀器等客觀指標來記錄判斷結果。然而,這些文件中記錄的結果也必須與主觀判斷相結合。

        熒光顯微鏡攝影對于記錄熒光圖像是非常必要的。由于熒光容易褪色和減弱,因此有必要記錄實時攝影的結果。這種方法與普通顯微鏡攝影方法基本相同。只需使用高速光敏膜,如ASA200或以上或24。在上面。由于紫外線對熒光的突然影響很大,如熒光標志FITC,當紫外線照射30秒時,熒光亮度降低50%,因此曝光速度太慢,無法捕獲熒光圖像。一般來說,熒光顯微鏡具有半自動或全自動顯微攝影系統

        注意事項:

        (1)熒光顯微鏡是嚴格按照操作說明書的要求制造的,不改變程序。

        (2)檢查應在暗室進行。進入暗室后,打開電源,點燃超高壓汞燈5-15分鐘。當光源發出強光并穩定時,眼睛能有效適應暗室,然后開始觀察標本。

        (3)為防止紫外線對眼睛造成傷害,在調節光源時佩戴防護眼鏡。

        (4)每次檢查時間為1~2h,超高壓汞燈發光強度逐漸降低,熒光降低;紫外線照射3~5分鐘后,熒光降低。因此,不超過2~3h。

        (5)熒光光學顯微鏡使用壽命有限,檢查應集中在樣品上,以節省時間,保護光源。天氣炎熱時,應增加冷卻風扇,應開始新的記錄時間來更換燈泡。后燈可以點亮,然后熄滅。燈完全冷卻。每天幾次,避免火源。

        (6)染色后,熒光會隨著時間,熒光會逐漸減弱。當樣品儲存在4℃的聚乙烯塑料袋中時,可以延緩熒光衰減,防止密封劑蒸發。

        (7)確定熒光亮度的標準:一般分為四個層次,即“1”-NO或可見弱熒光?!?+-只能看到明顯可見的熒光。

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